Oxygraph Oroboros Instrument

Institutionen för Medicinsk Biokemi och Biofysik bedriver forskning kring mitokondriens funktioner i hälsa och sjukdom. Mätningar av cellens syreförbrukning och NAD(P)H-nivåer är avgörande för forskningen och ett viktigt verktyg för att utvärdera mitokondriens kapacitet att förse cellerna med energi. Inom ramen för uppdragsforskning behöver institutionen köpa en utrustning för mätning av mitokondriers syreförbrukning och NAD(P)H-nivåer i mycket små mängder vävnadsprov, celler samt isolerade mitokondrier. Utrustningen ska kunna mäta syreförbrukning och NAD(P)H-nivåer med hög noggrannhet från små mängder prov eftersom det i många fall är begränsad tillgång till provmaterial. Vidare ska utrustningen tillåta flexibla protokoll med injektion av obegränsat antal substrat.

KI avser köpa en Oxygraph-2k NextGen- utrustning med NADH-modul från Oroboros Instruments som kan utföra de mätningar som projektet kräver. Nedan följer några av de krav på utföranden, som enligt KI:s kännedom, endast kan uppfyllas av en leverantör:

-Mäta syreförbrukning med hög känslighet och noggrannhet (upplösning = detektionsgräns “oxygen flux”: 1 pmol O2.s-1.cm-3, bakgrund vid en noll-koncentration av syre <0.02 μM O2).

-Noggrann temperaturkontroll (±0.002 oC, vid temperaturer från +4 till +47 oC) och minimal diffusion av syre från mätkamrarna (<3 pmol O2.s-1 .cm-3 vid temperaturer mellan 20 oC och 40 oC)

-Följa NAD(P)H-nivåerna i provet, parallellt med syreförbrukningen

-Möjlighet till flexibla protokoll med injektion/titrering av obegränsat antal substrat/inhibitorer/uncouplers

-Mäta syreförbrukning och NAD(P)H-nivåer i olika typer av prov (t.ex. isolerade mitokondrier, levande och permeabiliserade celler, permeabiliserad vävnad och homogenisat av små vävnadsbiopsier)

Förklaring:

Forskningen kräver ovan nämnda krav på funktioner (II.2.4) med anledning av nedan:

- Mäta syreförbrukning med hög känslighet och noggrannhet är avgörande för KI:s forskning eftersom vi måste kunna detektera även små skillnader mellan små mängder vävnadsprov, celler samt isolerade mitokondrier. För en del försök har KI även en mycket begränsad mängd provmaterial (vävnadsprov från patiens och/eller djur).

- Noggrann temperaturkontroll en förutsättning för mätning av syreförbrukningen med hög känslighet och noggrannhet.

- Följa NAD(P)H-nivåerna i provet, parallellt med syreförbrukningen. Genom att följa syreförbrukning och NAD(P)H-nivåer i ett och samma prov får man en tydlig bild av andningskedjans kapacitet och förutsättningarna för dess funktion i de prover som studeras. Denna information är av stor vikt för studier kring mitokondriens funktion i hälsa och sjukdom.

- Möjlighet till flexibla protokoll med injektion/titrering av obegränsat antal substrat/inhibitorer/uncouplers. Andningskedjan utgörs av fyra olika proteinkomplex. Genom att tillsätta olika substrat/inhibitorer/uncouplers som är specifika för de olika delarna i andningskedjan och samtidigt följa syreförbrukningen och NAD(P)H-nivåerna i provet kan man mer i detalj undersöka hur de olika delarna av andningskedjans fungerar i de prover som undersöks.

- Mäta syreförbrukning och NAD(P)H-nivåer i många olika typer av prov, t.ex. isolerade mitokondrier, levande och permeabiliserade celler, permeabiliserad vävnad och homogenisat av små vävnadsbiopsier. Det är viktigt eftersom KI arbetar med många olika modellsystem, t.ex. musmodeller, celler i cellkultur, bananfluga och patientprover.

Enligt KI:s kännedom finns det ingen annan leverantör på marknaden idag som erbjuder ett instrument med bevisade likvärdiga funktioner. KI kommer att teckna kontrakt med Oroboros Instruments efter avtalsspärr om 10 dagar efter publiceringen av denna frivilliga förhandsinsyn.

Mercell annons: https://opic.com/id/afpfsvqyiy